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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3481
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2026-03-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3481 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 | Cowpox Virus(CPV) | LZR3481 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
朱黃籃狀菌OxLDL (Oxidized Lowdensity Lipoprotein) ELISA Kit 拉丁屬名: Talaromyces minioluteus
Paenibacillus durusMAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus durus
解脂假絲酵母PUMA (P53 Upregulated Modulator of Apoptosis) ELISA Kit拉丁屬名: Candida lipolytica
加德納菌Smad3 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit拉丁屬名: Gardnerella vaginalis
長(zhǎng)蠕孢PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
褐囊蜜環(huán)菌PTHR2 (Parathyroid Hormone Receptor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
野土地桿菌PTHRP (Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Pedobacter agri
釀酒酵母PDAP1 (Pdgfa Associated Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
不產(chǎn)色鏈霉菌不產(chǎn)色亞種PTD (Pentosidine) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces achromogenes subsp. achromogenes
釀酒酵母PP (Pepsin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
噬果膠黃桿菌PYY (Peptide YY) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium pectinovorum
地衣芽孢桿菌PRF1 (Perforin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus licheniformis
康寧木霉Hp-IgM (Helicobacter Pylori IgM) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma koningii
相思根瘤菌PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
膨端青霉PPAR-γ (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor γ) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium inflatum
牛痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 CRABP2 細(xì)胞維甲酸結(jié)合蛋白2抗體13-羥基-8,11,13-羅漢松科三烯-18-酸(1S,4aS)-7-Hydroxy-1,4a-dimethyl-1,2,3,4,4a,9,10,10a-octahydrophenanthrene-1-carboxylic acid對(duì)照藥材 分 子 式: C17H22O3 分 子 量: 274.35478
CST7/Cystatin F 半胱氨酸蛋白酶抑制劑7抗體柚皮素(S)-5,7-Dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)chroman-4-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H12O5 分 子 量: 272.25278
NBL1/DAND1 神經(jīng)母細(xì)胞瘤抑瘤蛋白1抗體丹酚酸CSalvianolicacid C中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C26H20O10 分 子 量: 492.431
DLL4/Delta 4 Notch信號(hào)通路Delta樣配體4抗體山奈素ARTEMISININ中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H12O6 分 子 量: 300.26288
DPP2 溶酶體絲氨酸蛋白酶DPP2抗體京尼平1,4a,5,7a-Tetrahydro-1-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-cyclopenta(c)pyran-4-carboxylic acid methyl ester中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C11H14O5 分 子 量: 226.22586
FSTL1/FRP 卵泡相關(guān)蛋白1維生素UVitamin U中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C5H11NO2S.CH5S+.Cl- 分 子 量: 233.77974
HPGD/PGDH1/Prostaglandin dehydrogenase 1 素脫氫酶1抗體2,3-脫氫維酮5,7-Dihydroxy-3-(2,4-dihydroxyphenyl)-8-(3-methyl-2-butenyl)-4H-1-benzopyran-4-one對(duì)照藥材 分 子 式: C20H18O6 分 子 量: 354.35332
